文章信息
IF=14.919
引用產品：bs-0979R（Rabbit Anti-CD38）
Sample：Rat
Application：IF
文章作者及單位：王金鳳 中國科學院北京生命科學研究院
文章摘要
研究背景
人體不同系統內微生物群并不是彼此分離。異源細菌可能普遍傳播和定植于另一個組織或器官，刺激炎癥并增加癌癥等疾病發生的風險。以往存在許多微生物交叉定植的例子，例如共生細菌可從其他部位傳播到孕婦子宮腔及胎兒體內，以及由于腸道細菌易位到胎盤而誘發先兆子癇。普遍認為胃酸可以阻止口腔與腸道之間有效微生物通訊和易位，但近期已證實口腔細菌可頻繁通過消化道遷移到腸道。在胰腺癌和結腸直腸癌中均觀察到特定口腔細菌如核梭桿菌的富集。
類似胃液和宮頸粘液，可以阻礙微生物在口腔與腸道、子宮腔與陰道之間自由通過。而當前高遷移率子宮微生物和細菌物種的來源被廣泛關注。與陰道微生物群相反，目前仍對子宮腔內微生物群缺乏了解。據報道女性上生殖道中可能普遍存在活菌，其中包括子宮在內。關于微生物類群，主要在同一個體生殖道的不同部分之間共享，這表明從陰道到腹膜，微生物群逐漸變化，據推測女性下生殖道或腹膜液中微生物可轉移至上生殖道中。
各類乳酸桿菌是健康育齡女性陰道中的主要細菌，其產生的乳酸可維持陰道環境低pH值，抑制有害菌生長，使微生態保持相對平衡的狀態。而在異常情況下，陰道乳酸桿菌豐度可能顯著降低，導致pH升高。pH值升高會導致有害細菌如加德納菌和普雷沃氏菌的增殖，從而導致微生態失調以及相關疾病發生風險的增加，包括細菌性陰道病和尿路感染。同樣子宮微生物群的改變與各種宮內疾病密切相關，如子宮內膜異位癥，子宮內膜息肉和子宮內膜癌，甚至可能影響子宮內膜對胚泡的接受性。由此可見，陰道和子宮微生物群的生態穩定性對女性生殖系統的健康起著重要作用。理論上，子宮腔和陰道在生理上是相鄰的，陰道細菌有機會通過子宮頸向上遷移至子宮。以往研究推測宮內感染是由陰道細菌上升到宮腔引起的，但這兩個部位之間的微生物交流仍不清楚，當陰道細菌轉移到上生殖系統時，子宮內微生物群調節和疾病誘發的機制仍然模糊不清。
研究結果（一）
陰道擾動引起的子宮微生態失調
實驗設計：
本實驗隨機選擇健康、患有慢性子宮內膜炎和細菌性陰道病的女性各10名，并對其進行陰道灌洗，將灌洗液移植到已接受1周抗生素治療的SD大鼠(n=10)陰道中。移植后每天一次（連續3周）進行qPCR和ELISA實驗，治療結束后進行顯微鏡學觀察、TNF-α和CD38免疫熒光實驗。
實驗結果：
在慢性子宮內膜炎患者陰道菌群移植的大鼠中，TNF-α、CD38、IL1β等細胞因子和炎性因子的mRNA表達水平比移植健康組和對照組的微生物群顯著升高。細菌性陰道病組中細胞因子水平也有所升高但低于慢性子宮內膜炎組，該結果反映子宮內膜炎患者陰道微生物群可有效刺激子宮炎癥。慢性子宮內膜炎組大鼠子宮體水腫增大，表現為多發點狀炎性病變(5×視野)，子宮內膜增生(25×)和多核細胞增多(50×)。免疫熒光檢測結果顯示，與健康組和對照組相比，慢性子宮內膜炎組的子宮內膜組織中存在TNF-α和CD38信號。
實驗結論：
慢性子宮內膜炎女性陰道微生物群可引起子宮腔炎癥，可能由細菌易位或炎癥因子引起，這些因子可穿過宮頸屏障進入子宮腔。
陰道細菌對子宮內膜的破壞及保護作用
作者為研究某些陰道細菌遷移對子宮腔的影響及其對子宮炎癥的刺激，將單個細菌移植到陰道中以建立宮內炎癥模型。像普氏菌和梭狀芽孢桿菌為建模的理想菌種，可在子宮內膜炎患者子宮或陰道微生物群中富集，并在不同身體部位表現出協同變異。作者通過基因測序等數據分析發現子宮內膜炎組的普氏菌與梭狀芽孢桿菌更豐富。普氏菌，最初是從子宮內膜分離出來的一種菌屬；產氣莢膜梭菌曾用于構建子宮內膜炎模型，以上兩種菌屬將用于以下陰道移植實驗。
作者推測陰道中可能存在某些細菌可通過逆轉二路普氏菌或產氣莢膜梭菌炎癥作用而發揮保護作用。鑒于健康女性子宮和陰道微生物組中乳酸桿菌相對豐度顯著高于子宮內膜炎患者，故作者選擇鼠乳桿菌評估其對SD大鼠子宮內膜健康的保護作用。
實驗設計：
處理組：
將生長至對數期的二路普氏菌每日一次（持續3周）注射到SD大鼠陰道中，注射完成3天后收集宮內組織和子宮陰道灌洗液樣品，同時對產氣莢膜梭菌也進行相同的移植程序。干預組：普氏菌和產氣莢膜梭菌每周四次（持續三周）移植到陰道中以誘導子宮腔炎癥。同時將鼠乳桿菌移植到陰道內一次，在每兩次產氣莢膜梭菌處理后交替補充，使得產氣莢膜梭菌和鼠乳桿菌分別每周移植到陰道中四次和兩次。為驗證陰道中細菌代謝物是否也可以引起子宮炎癥，作者增加移植一組產氣莢膜梭菌上清液，該處理與產氣莢膜梭菌組相似，不同之處在于活細菌被其培養液的上清液代替，干預3周。進行顯微鏡學觀察、免疫熒光、熒光原位雜交及基因測序。
實驗結果：
處理組結果：與對照組相比，處理組宮內組織炎癥因子水平，子宮體直徑，宮腔和陰道細菌生物量均顯著增加，且以上指標之間存在顯著正相關，處理組大鼠子宮體表現出水腫增大；TNF-α和CD38抗體的組織切片和免疫熒光結果表現多發點狀炎癥和子宮內膜增生；熒光原位雜交結果顯示子宮腔內細菌總數與移植細菌種類生物量均成較高趨勢。干預組結果：僅移植產氣莢膜梭菌的大鼠宮腔組織炎癥因子、子宮體直徑、宮腔陰道細菌量明顯增高。且鼠乳桿菌移植組和產氣莢膜梭菌上清液組之間沒有顯著差異。通過基因測序，顯示移植產氣莢膜梭菌的子宮腔內有更多的梭菌。產氣莢膜梭菌陰道移植大鼠的子宮微生物組中發現有類桿菌屬和普氏菌的富集，而雙歧桿菌則呈現相反的趨勢。
實驗結論：
陰道中的細菌可以上升到子宮腔中定殖、生長引起炎癥，但若僅通過將其代謝物釋放到陰道中則不能達到相同水平的刺激。鼠乳桿菌可以抑制陰道產氣莢膜梭菌的生長并減少子宮產氣莢膜梭菌和其他有害菌生物量，因此可能在減少子宮炎癥中起保護作用。
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